学生姓名:卢班级:11407学号:
所在院系:理学院专业:药学实验课题:戊巴比妥钠ED50的测定日期:20__年_月_日
实验:戊巴比妥钠ED50的测定
实验目的:
1、学习小鼠的捉拿以及腹腔注射的方法
2、学习实验动物常用的分组和编号方法3、学习整体动物质反应的实验方法4、学习ED50的实验和计算方法
实验原理:
1.戊巴比妥钠为镇静催眠药,随着剂量加大,相继出现镇静、催眠、抗惊厥、麻醉、死亡。
2.药物效应和药物剂量的关系称量效关系,从不同角度观察,有量反应和质反应之分。量反应:特定反应程度与剂量的关系,如血压的升高、血糖的降低等。质反应:特定反应出现与否与剂量的关系,如死亡与否、阳性或阴性等。
3.质反应实验中,以对数剂量为横坐标、反应百分率为纵坐标绘图,形成一条对称的“S”形曲线。
半数有效量(ED50):50%的实验动物有效时对应的剂量。半数致死量(LD50):50%的实验动物死亡时对应的剂量。4.药物安全性的评价治疗指数(TI)=LD50/ED50安全系数(SF)=LD5/ED95可靠安全系数(CSF)=LD1/ED99三者数值大,说明药物安全性好。
5.实验设计三大原则:重复、随机、对照
随机原则:使每个实验对象在接受处理因素时,有相同的机会,以减少主观因素所带来的偏性误差。
均衡随机法分组:先按易控制的因素(性别、年龄、体重等)均衡分档,然后在每一档随机取出等量的动物分配到各组,使难控制的因素(活泼程度、饥饱、疲劳程度等)得到随机安排。
实验材料:
1、器材:天平秤若干台,注射器、针头若干,小鼠笼若干
2、药品:5个浓度系列的戊巴比妥钠,分别是20mg/kg、26mg/kg、35mg/kg、46mg/kg、60mg/kg。
3、动物:健康的小鼠,体重13~17g,雌雄各半,共50只
实验步骤:
1、给小鼠称重并标记
2、将小鼠随机分为五个剂量组,每组10只
3、各组分别腹腔注射戊巴比妥钠20mg/kg、26mg/kg、35mg/kg、46mg/kg、60mg/kg(0.2ml/10g),以翻正反射消失为入睡指标,给药5min后记录各组睡眠鼠数填入表中。
数据处理:
ED50=37.28mg/kg
注意事项:
1、分组时采用均衡随机法
2、小鼠入睡指标-翻正反射消失,保持室内安静,已睡眠鼠与未睡眠鼠分笼放置。3、实验动物应挑选体重相近(20g2g)的健康小鼠,最好雌雄各半或同一性别,怀
孕的雌鼠应剔除不用。4、精密测定ED50前,通常先要摸索出合适的计量范围,即测出能使小鼠出现接近0%和100%呈阳性的剂量。
5、给药时最好从中剂量组开始,以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适,如不合适可随时进行调整。
6、小鼠称重及给药剂量力度力求准确,药液的pH及渗透压应在生理范围内。7、动物的饥饱、实验室温度、实验时间等均会影响实验结果,应尽量保持一致。
1、在观察小鼠的翻正过程中,有的小鼠在15min时才停止了翻正反射,正常情况小鼠应在3~5min时停止翻正反射,这并不符合呈阳性小鼠的正确反应,小鼠在15min时停止翻正反射,可能是由其他的原因导致。
2、在注射药物之后,出现肿块,说明药物被注入了皮下组织,这种情况我们并不能确定进入小鼠腹腔内的药量,因此,这只小鼠的操作失败,不能将其考虑进实验结果;若出血也应如此处理。
3、1组和2组呈阳性鼠数皆为零,而3组却有4只鼠呈阳性,结果的跨越太大,浓度的设计并没有问题,那么可能是配置的过程中人为造成的较大误差导致,也有可能是实验小鼠的健康状况差异造成,或许和环境也有关系。